背景介紹

植入式醫(yī)療器械表面產(chǎn)生的細(xì)菌黏附可引起災(zāi)難性感染，給患者帶來極大的痛苦和經(jīng)濟(jì)壓力。在醫(yī)療器械改性時(shí)使用抗生素，細(xì)菌抗生素耐藥性變得越來越大。與此同時(shí)，材料表面的化學(xué)修飾在防止細(xì)菌積聚和因此接近方面具有差的長(zhǎng)期性能，通過機(jī)械表面形貌實(shí)現(xiàn)殺菌作用近年來變得越來越重要。本文介紹了高分子材料表面改性后用于機(jī)械殺菌效果的進(jìn)展，重點(diǎn)是了解納米結(jié)構(gòu)和細(xì)菌細(xì)胞壁之間的相互作用、有效的納米結(jié)構(gòu)殺菌表面的基本設(shè)計(jì)參數(shù)以及殺菌機(jī)理模型。

主要的抗菌手段

細(xì)菌黏附于醫(yī)療器械表面的初始階段，可快速增殖形成一層致密生物膜，一旦生物膜開始形成，抑制細(xì)菌增殖將變得相當(dāng)困難。高分子醫(yī) 療器械表面大多數(shù)不具有殺菌作用，因此，抗細(xì)菌吸附、抗生物膜形成，是醫(yī)用高分子料表面改性的主要方向現(xiàn)存抗菌材料的抗感染途徑主要包括了抗細(xì)菌黏附、接觸殺菌及藥物釋放殺菌、機(jī)械殺菌4類。機(jī)械殺菌是利用材料表面特殊拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)實(shí)現(xiàn)抗菌效果，較具代表性的材料為黑硅?？桂じ酵繉雍徒佑|殺菌涂層主要是通過化學(xué)接枝手段實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)鏈高分子聚合物（如聚乙二醇等）或抗菌物質(zhì)（如季銨鹽等）的材料表面固定化。黏附涂層在抑制細(xì)菌黏附的同時(shí)也可能影響損傷修復(fù)細(xì)胞的黏附，通常表現(xiàn)為有一定的細(xì)胞毒性。

細(xì)菌細(xì)胞壁分類

細(xì)菌細(xì)胞壁是一種多層結(jié)構(gòu)，可為細(xì)菌提供強(qiáng)度、剛度和形狀，并保護(hù)細(xì)菌免受滲透破裂和機(jī)械損傷，機(jī)械殺菌的機(jī)制就是破壞細(xì)菌細(xì)胞壁的過程。根據(jù)其結(jié)構(gòu)、組分和功能，細(xì)菌細(xì)胞壁可分為兩大類：革蘭陰性和革蘭氏陽性。革蘭氏陰性細(xì)胞壁是由外膜和一層7~8 nm的肽聚糖組成，外膜和肽聚糖通過脂蛋白連接，肽聚糖又位于外膜和細(xì)胞質(zhì)膜之間的周質(zhì)內(nèi)。外膜含有一種可以穿過膜的、親水的小分子孔蛋白以及延伸到細(xì)胞外空間的脂多糖（LPS）分子。外膜中的這些成分對(duì)于革蘭氏陰性細(xì)菌的結(jié)構(gòu)完整性和活力是必不可少的。革蘭氏陽性細(xì)胞壁含有一層厚的30~100 nmPG層（比革蘭氏陰性細(xì)菌厚4~5倍），它其中含有磷壁酸和脂磷壁酸，磷壁酸附著并嵌入PG層中，而脂磷壁酸延伸到細(xì)胞質(zhì)膜中。

醫(yī)用高分子材料表面改性后殺菌效果

有研究表明，使用納米壓印光刻來制作聚甲基丙烯酸甲酯（PMMA）表面的仿生納米柱后并接種大腸桿菌，相較于在平坦的PMMA表面上大腸桿菌呈形態(tài)正常的棒狀，在擁有納米柱的結(jié)構(gòu)上，當(dāng)細(xì)菌伸展在幾根柱子上時(shí)，細(xì)菌出現(xiàn)了萎縮，柱子上不規(guī)則的（塊狀）細(xì)菌表明細(xì)胞已經(jīng)破裂，膨脹壓力已經(jīng)消失。柱狀表面與平面相比具有較低的黏附細(xì)菌密度（平膜上67％~91％的密度）。此外，黏附的大部分大腸桿菌死于柱狀表面（死亡部分比平膜上高16％~141％）。研究還指出，較小間距的納米柱具有更好的殺菌性能。較小間距且較小的納米柱與平面對(duì)照相比，在24 h內(nèi)將細(xì)菌水性懸浮液中的負(fù)荷降低了50％。通過對(duì)細(xì)胞取向數(shù)據(jù)的定量分析，確定較佳納米柱間距的較小閾值在 130~380 nm之間。細(xì)菌細(xì)胞長(zhǎng)度的測(cè)量也表明納米柱對(duì)大腸桿菌形態(tài)產(chǎn)生不利影響?？傊?，這項(xiàng)工作表明，具有準(zhǔn)確尺寸的幾何形狀的印跡聚合物納米結(jié)構(gòu)可以在不進(jìn)行任何化學(xué)修飾的情況下殺死細(xì)菌。

納米結(jié)構(gòu)表面的機(jī)械特性對(duì)其殺菌功效的影響

納米結(jié)構(gòu)表面的殺菌活性取決于幾個(gè)參數(shù)，例如納米結(jié)構(gòu)的尺寸、形狀和間隔/密度。這些結(jié)果表明，可以通過納米結(jié)構(gòu)的密度和直徑來調(diào)節(jié)殺菌效率。然而，他們沒有解釋具有較小直徑和較高密度的較高殺傷效率背后的潛在機(jī)制。細(xì)菌和納米結(jié)構(gòu)表面之間的黏附強(qiáng)度是納米結(jié)構(gòu)中的重要元素，誘導(dǎo)細(xì)胞破裂。細(xì)菌細(xì)胞壁和表面之間的較大黏附力導(dǎo)致給定納米結(jié)構(gòu)幾何形狀破裂的可能性很高。細(xì)菌與納米結(jié)構(gòu)表面的黏附取決于表面的疏水性/親水性和細(xì)胞膜組成。當(dāng)受到納米結(jié)構(gòu)表面的挑戰(zhàn)時(shí)，細(xì)菌將通過增加與多個(gè)錨定點(diǎn)的接觸面積來嘗試沉積在納米結(jié)構(gòu)表面上。在該拉伸過程中，當(dāng)細(xì)胞壁達(dá)到作用于其上的應(yīng)變的閾值極限時(shí)，細(xì)胞壁破裂可以發(fā)生。如果存在于表面上的納米結(jié)構(gòu)是柔韌的，則它們可能彎曲并且更難以獲得拉伸的細(xì)胞壁破裂的閾值應(yīng)變。因此，這種柔韌性可能使細(xì)菌使納米結(jié)構(gòu)變形，使得微生物可以在“釘床”上沉降和增殖。